Presentación y bienvenida
Este es un blog práctico destinado a quienes se inician en la investigación de laboratorio que acepta -y agradece- vuestras aportaciones. Incluye conceptos básicos, procedimientos de laboratorio y espero que os sea una herramienta útil en vuestro trabajo diario.
Arrancaré con cuestiones de química y biología molecular, pero no descarto lo demás. Cuento con vosotros para enriquecerlo y mejorarlo día a día. Suerte y éxito en vuestras investigaciones.
Fdo.: La autora.
8/11/12
Preparando fenol
FENOL
– Fundir el fenol a 68-70 ºC
– Añadir 0.1 % de 8-hidroxiquinolina (esta actua como antioxidante, inhibe a la RNasa y además quela iones metalicos)
– Extraer varias veces (3 a 4) con igual volumen de Tris/HCL 1 M pH=8, aproximadamente hasta que la fase acuosa esté a 7-7.5 de pH
– Eliminar la última extracción (bomba de vacio)
– Añadir Tris/HCL 100 mM pH=8
O se puede hacer ya en el tubo una extracción con 100 mM Tris/HCl pH=8 y luego mantener a 4ºC con 10 mM Tris/HCL pH=8.
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